Активный воздушный пробоотборщик для непрерывного мониторинга жизнеспособных частиц воздуха с минимальными заменами пластин (Джон Обб)

Кроме того, требуется исследовать любые микробные счета и идентифицировать все изолированные организмы до уровня вида. Также необходимо изучить их потенциальное воздействие на качество продукции для каждой партии и общий контроль состояния в процессе стерильного производства в рамках документированной системы.

В данной статье рассмотрен новый дизайн активного воздушного пробоотборщика, который способен обеспечивать очень высокую, ведущую в отрасли, биологическую эффективность и может использоваться для выборки воздуха объемом 1 кубический метр. Более того, этот новый пробоотборщик может работать до 4 часов с одной пластиной TSA (триптиказой агар) в критически оцененных рисковых зонах в средах класса A с минимальными вмешательствами человека.

Этот метод активного пробоотбора воздуха может дополнить или заменить осажденные пластины для более точного микробиологического отбора на протяжении всей производственной серии, обеспечивая более глубокое понимание уровня микробиологического контроля в зоне класса A.

Введение

Чистые среды используются для контроля и ограничения микробного загрязнения, когда существует риск для качества продукции, пациента или потребителя.

В зонах класса A, таких как чистые помещения, изоляторы или RABS (системы ограниченного доступа), необходимость в установлении и поддержании микробиологического контроля требует понимания источников загрязнения.

Выбор наиболее подходящих методов для оценки присутствия микробной биобремени с сопутствующими рисками должен быть глубоко изучен для каждого отдельного процесса и объекта. Затем тщательно выбранный лучший вариант должен стать частью документированной и подтвержденной программы экологического мониторинга (EM).

В рамках этой программы EM необходимо учитывать последние нормативные положения, особенно в отношении микробного мониторинга на протяжении всего стерильного производственного процесса. С точки зрения микробного риска, фармацевтическая промышленность традиционно выполняет «снимки» для выявления присутствия/отсутствия биобремени. Однако не стоит ли нам проводить микробный мониторинг на протяжении всей производственной серии, чтобы получить более надежное понимание наших критических областей?

Непрерывный микробный мониторинг с точным, подтвержденным методом имеет гораздо большее значение и может дать гораздо более четкое понимание присутствия микробов и потенциального риска для вашего продукта в процессе стерильного производства.

Давайте рассмотрим некоторые области более подробно:

• Текущие стандарты, касающиеся выбора наиболее подходящего AAS (активного воздушного пробоотборщика) как части программы EM.
• Различные конструкции/методы AAS.
• Преимущества и недостатки, которые следует учитывать при проектировании AAS для класса A и использованных пластин с питательной средой.
• Введение нового дизайна с щелью для агара с первыми результатами валидации.

Текущие стандарты, касающиеся выбора наиболее подходящего AAS как части программы EM

Есть 3 основные стандарта/регламента, которые наиболее актуальны для рассмотрения:

ISO 14698-1:2003¹

Этот стандарт находится на стадии замены на CEN 17141. Однако важная часть, касающаяся AAS, остается. Этот стандарт ISO описывает необходимость пробоотборщика, который эффективно захватывает жизнеспособные частицы на подходящей питательной среде с точки зрения как биологической, так и физической эффективности. Для каждого из этих аспектов описан метод валидации.

Биологическая эффективность — это способность AAS эффективно захватывать частицы, несущие микробы, с минимальным высушиванием или разрушением микробов при скорости воздуха, проходящего через щель или сито пробоотборщика. Также необходимо учитывать эффект высыхания на выбранную питательную среду. Нет ли роста из-за того, что вы контролируете, или потому что среда высохла?

Физическая эффективность — это способность AAS эффективно захватывать частицы разного размера. На физическую эффективность влияют множество факторов, включая: геометрию головки, длину и ширину щели или диаметр и количество отверстий в головке импактора, в зависимости от метода. Также важным фактором является скорость воздействующего воздуха и точность зазора между головкой пробоотборщика и поверхностью агаровой пластины.

Также в ISO 14698-1 содержатся некоторые подсказки (но не конкретные конструкции) о том, что должен включать в свою спецификацию AAS при рассмотрении, как сделать подходящий AAS для класса A, среди ключевых указаний:

• Должен быть способен забирать достаточное количество воздуха за разумное время (интерпретируется как минимум 1 кубический метр воздуха за несколько минут на быстрейшем уровне AAS и до 4 часов на самом медленном)
• Должен иметь способность эффективно забирать частицы размером до 1 мкм. Это может быть выражено как требование для AAS класса A иметь значение d2 1 мкм (или меньше). Обратите внимание, что значение d₅₀ 1 мкм является пороговым значением, при котором 50% частиц размером 1 мкм захватываются в пробоотборщике, а 50% не захватываются.
• Выхлоп не должен нарушать унидирекциональное воздушное движение помещения, т.е. выхлопной воздух должен быть отведен от окружающей зоны или рассеивается мягко.
• AAS не должен загрязнять окружающую среду, т.е. выхлопной воздух должен быть отведен или проходить через подходящий фильтр HEPA.

EN 17141: 2020³

Когда этот европейский стандарт будет опубликован в ближайшее время, он заменит ISO 14698 в Европе. Он учитывает современные разработки и практики. В частности, касающиеся AAS, он подчеркивает важность биологической эффективности и необходимость иметь соответствующую эффективность сбора для исследуемой зоны. Важным моментом является значимость этого в контексте Приложения 1. В принципе, это можно интерпретировать как требование для точного признания «отсутствия роста», что AAS должен иметь значение d₅₀ лучше, чем 1 (т.е. меньше 1 мкм) в сочетании с высокой биологической эффективностью, иначе существует риск того, что в лучшем случае будет только 50% вероятность захвата частиц 1 мкм.

EU GMP Annex 1: Производство стерильных лекарственных продуктов (пересмотр 12, в финальной консультации на 20 февраля 2020 года)₄ Разделы 9.24–9.33, посвященные «Экологическому и персональному мониторингу – жизнеспособные частицы», имеют отношение к EM и выбору соответствующих методов.

Особый интерес представляют разделы 9.27, 9.29 и таблица 7 в 9.30, которые приведены здесь полностью:

9.27 Непрерывный мониторинг жизнеспособных частиц воздуха в зоне класса A (например, пробоотбор воздуха или осажденные пластины) должен проводиться на протяжении всего критического процесса, включая сборку оборудования (асептическая настройка) и операции по заполнению. Подобный подход должен быть рассмотрен для чистых помещений класса B, исходя из риска воздействия на асептическую обработку. Мониторинг должен проводиться таким образом, чтобы все вмешательства, временные события и любые ухудшения системы были зафиксированы, а риск, вызванный вмешательствами в процессе мониторинга, был исключен.

9.29 Методы отбора проб и используемое оборудование должны быть полностью понятны, а процедуры должны быть предусмотрены для правильной эксплуатации и интерпретации полученных результатов. Эффективность восстановления выбранных методов отбора проб должна быть квалифицирована.

9.30 Лимиты действия для загрязнения жизнеспособными частицами показаны в таблице 7 [Приложение 1].

Таблица 7: Максимальные предельные значения для загрязнения жизнеспособными частицами

a. Плиты осаждения должны быть открыты на протяжении всех операций и заменяться по мере необходимости через каждые 4 часа (время воздействия должно быть основано на валидации, включая исследования восстановления, и не должно оказывать отрицательного воздействия на пригодность используемой среды). Отдельные плиты осаждения могут быть открыты на время меньше 4 часов.

b. Следует отметить, что для класса A любой рост должен привести к расследованию. Примечание (a) выше предоставляет возможность рассматривать замену плит осаждения на AAS, которые могут снимать пробы в течение 4 часов на одной пластине, давая время выборки, эквивалентное нормальному времени воздействия на плиту осаждения, но с значительно лучшей эффективностью сбора (постоянно более чем в 10 раз) по сравнению с плитой осаждения (см. далее).

Разные дизайны/методы активных воздушных самплеров (AAS)

Существуют различные методологии AAS, которые развивались со временем.

Наиболее часто встречающиеся из них:

a. Центробежные – используют полоски агар. Этот самплер вызывает чрезмерную турбулентность, и полоски требуют манипуляций с инструментом для инкубации. Не подходит для класса A.

b. Фильтрация – использует мембрану из желатинового фильтра для захвата частиц из окружающей среды. После выборки мембрана из желатина должна быть асептически перенесена на чашку Петри с агаровым средой Trypticase Soy Agar (TSA) и раствориться, освобождая захваченные частицы на среду для инкубации. Эта манипуляция делает метод непригодным для класса A.

c. Сито-самплер – использует фиксированную головку выборки, расположенную (обычно) на расстоянии 2,5 мм над поверхностью плиты TSA. Это может быть сито с 300 небольшими отверстиями или несколькими радиальными щелями, размеры которых рассчитаны на достижение скорости, позволяющей добиться значения d₅₀ до примерно 1 мкм или чуть больше. Для различных сито-самплеров доступны разные скорости потока воздуха, от 1 кубического фута в минуту (эквивалентно 28,3 литра в минуту), что занимает 35 минут 20 секунд для выборки 1 кубического метра, до 100 литров в минуту, что занимает 10 минут для выборки кубического метра. Есть и более быстрые AAS, которые могут выбрать кубический метр за несколько минут. Однако следует быть осторожным, так как некоторые конструкции сито-самплеров значительно менее эффективны с гораздо более высокими значениями d₅₀ (например, >10 мкм), и их следует использовать только для тренинга, где ожидаются значительно более высокие показатели.

Сито-самплер является "интервальным самплером", и среда должна быть заменена после каждого кубического метра воздуха. Так как воздух воздействует на одни и те же фиксированные точки на поверхности агара, происходит естественное высыхание среды в этих точках, и частицы, попавшие на них, могут высыхать, снижая биологическую эффективность. Как метод, он требует тщательной квалификации, если намерение заключается в использовании сито-самплера для класса A. Однако выборка представляет собой всего лишь снимок воздуха в момент взятия пробы. Положительный результат на рост имеет значение, но отрицательный результат может ввести в заблуждение, так как могут быть длительные интервалы, в течение которых пробы не берутся. Для областей, где ожидаются немного более высокие уровни микроорганизмов, таких как C, D или неклассифицированные зоны, это хороший метод для тренинга. Сито-самплеры могут работать от батарей или сети, либо быть встроенными в систему объекта. Их также можно располагать с головкой на выбранной точке пробоотбора, при этом органы управления и вакуумный источник располагаются на безопасном расстоянии.

a. Сэмплер с щелью на агаре – оптимальный метод для самых критичных зон класса A, оцененных по риску. Эти самплеры имеют фиксированную радиальную щель в головке пробоотборника, расположенную над агаровым пластином, который вращается до 360 градусов за выбранное пользователем время. Воздух воздействует на свежую часть агара непрерывно, обеспечивая d₅₀ значение лучше (меньше) чем 1, что поддерживается на протяжении всего процесса. Эти AAS обладают дополнительным преимуществом отличной биологической эффективности, так как свежий агар постоянно представлен воздействующему воздуху. Этот метод также позволяет прикреплять изокинетический зонд к щельному сборнику, так что в некоторых ситуациях головка пробоотборника может быть отнесена на расстояние до 8 футов от критичной точки пробоотбора. Современные приборы могут работать от батарей/сети или через Power over Ethernet (PoE), или быть встроены в индивидуальную программную систему клиента или систему управления объектом (FMS), с органами управления и вакуумным источником, расположенными удаленно.

Требования к дизайну AAS для среды класса A

1. Если у самплера значение d₅₀ составляет 1 мкм, то существует только 50% шанс того, что органика размером 1 мкм будет воздействовать (по ссылке). Последняя версия приложения Annex 1 устанавливает цель на отсутствие роста. Таким образом, целевой показатель для AAS для класса A должен быть ниже 1 мкм. Как ориентир для достижения этого, скорость воздуха между щелью или отверстием в головке выборки и местом воздействия на агар не должна быть ниже 30 м/с, но может быть значительно выше, при условии, что биологическая эффективность не снизится.
2. Биологическая эффективность должна быть высокой. Важно поддерживать точный и стабильный зазор между щелью и поверхностью агара (обычно 2,5 мм), иначе скорость воздействия будет сильно колебаться. Тип среды, объем наполнителя и влажность агара — все это влияет на эффективность. Свежая среда должна постоянно подаваться в поток воздействующего воздуха для достижения этого.
3. Эффективность сбора AAS должна быть соответствующей для класса проверяемой области.
4. Желательно, чтобы AAS мог работать на одной пластине в течение длительного времени, прежде чем ее нужно будет заменить. Плита осаждения обычно открыта в течение 4 часов, поэтому это должно быть целью для AAS. Это позволит проводить более осмысленное мониторирование на протяжении всей партии, вместо того чтобы проводить моментальные выборки, которые предоставляют мало информации о качестве воздуха в течение всего производственного процесса.
5. Минимальное вмешательство человека важно. Частая замена пластин на AAS создает риск потери стерильности и должна быть минимизирована.
6. Используемые среды могут значительно различаться. Это требует тщательной валидации и регулярных аудитов соблюдения GMP у производителя и его внутренних методов, контролей и стандартных операционных процедур (SOPs). Следующие соображения касаются среды:
   
   

   a. Обычно используется гамма-облученный агар Trypticase Soy Agar (TSA), а также агар Sabouraud Dextrose Agar (SDA) для плесени, если это необходимо. Оба типа заливаются в чашки Петри диаметром 9 см.

   b. Доступны различные объемы наполнителя агара (обычно 18 мл, 25 мл и 32 мл), однако точные объемы могут различаться у разных поставщиков.

   c. Влажность пластин может варьироваться. Упаковки, хранящиеся при комнатной температуре, тройно завернутые и герметично запечатанные, лучше удерживают влагу в агаре, чем изначально дышащие упаковки. Важно использовать свежие пластины с максимально возможным уровнем удерживаемой влаги для оптимизации работы.

   d. Разные производители используют различные уровни гамма-облучения (от 12 до > 25 килогрей (кГр)) для окончательной стерилизации своих пластин. Это имеет значительное влияние на плодородие, прочность геля и удержание влаги в среде. Более высокая прочность геля удерживает больше влаги, но снижает плодородие пластин. Выбранная пластина от проверенного производителя должна показывать стабильное плодородие при испытаниях на вызов в каждой партии и поддерживать приемлемое варьирование между партиями.

   e. Может ли новый дизайн AAS снимать пробу на той же пластине в течение того же времени, что и плита осаждения? После воздействия пластина с средой инкубируется в течение 5 дней: либо 2 дня при 30–35°C, а затем 3 дня при 20–25°C; или инкубация только при 30–35°C на протяжении 5 дней, чтобы поддерживать рост микроорганизмов из окружающей среды и от оператора. Валидация PQ для AAS должна доказать, что пластина сохраняет достаточную влагу и плодородие, чтобы вырастить организмы, полученные в течение всего времени выборки.

Представляем ImpactAir ISO-90, новый дизайн Slit-to-Agar

Основные особенности дизайна

Основные особенности нового устройства:

a. Slit to agar AAS с использованием 9-сантиметровой агар-тарелки;

b. Заводские сменные сборки щелей. Все щели имеют длину 22 мм, но ширину можно выбрать от 0,1 мм до 0,8 мм;

c. Переменные расходные значения, в литрах в минуту: 5, 10, 15, 28,3 (1 cfm), 50 и 70;

d. Полученные значения d₅₀ от 0,46 мкм до 0,95 мкм;

e. Может взять 1 кубический метр воздуха или может непрерывно снимать в течение 4 часов с одной тарелки, обычно снимая 3 или 4 кубических метра воздуха, если настройка выбрана соответствующим образом;

f. Биологическая эффективность значительно улучшена, особенно важно при использовании настройки с d₅₀ менее 1 мкм. Позволяет дольше снимать образцы;

g. Варианты дизайна включают автономное устройство, работающее от сети, от батареи/сети или с питанием через Ethernet (POE). Также имеется удаленное устройство, работающее от внешнего вакуумного источника и контроля, расположенное вдали от чистой зоны, которое можно при необходимости интегрировать в систему управления лабораторной информацией клиента (LIMS), в специализированную локальную систему или в систему управления объектом (FMS).

Таблица 1 показывает влияние изменения размеров щелей и изменения воздушных потоков через головку сэмплера на объем воздуха, снятого за продолжительные периоды времени (до 4 часов) на одной тарелке. Это достигается при поддержании высоких скоростей воздействия, обеспечивающих производительность d₅₀ значительно ниже 1 мкм.

Начальные тесты на проверку

Начальные тесты на проверку были проведены клиентом в контролируемой лабораторной зоне и представлены на недавней конференции.5 В тестах использовались четыре различных AAS, один из которых был проверенный клиентом эталонный сэмплер, использующийся в их зонах класса A:

• ImpactAir-140 (тарелка 14 см TSA), сэмплер slit-to-agar – эталонный сэмплер.
• ImpactAir ISO-90 Head (тарелка 9 см) с удаленным вакуумным источником ISO-CON и сенсорным экраном – новый дизайн сэмплера slit-to-agar.
• Сито-сэмплер A (тарелка 9 см) – предназначен для изоляторов класса A.
• Сито-сэмплер B (тарелка 9 см) – предназначен для изоляторов класса A. Эталонный сэмплер был независимо протестирован против собственного.



Рисунок 1: Два альтернативных варианта ISO-90 Head: a) установлен на подставке с санитарным фланцевым соединителем для быстрого снятия (слева); и b) стоящий отдельно (справа)



Рисунок 2: ISO-90 Sampling Head, стоящий отдельно, расположенный в зоне сэмплирования класса A (слева), подключенный через вакуумную трубу и электрическое соединение через гнездо с легким доступом к управляющему устройству ISO-CON, безопасно расположенному вдали от зоны класса A (справа). Доступны различные гнезда и подставки из нержавеющей стали для различных установок.

Таблица 1: Влияние различных размеров щелей и разных расходных значений на значения d₅₀ и объем снятого воздуха

Ширина щели (мм)	Расход (л/мин)	d50 (мкм)	Скорость воздействия (м/с)	Время 1 м3 (мин)	Объем за 1 час (м3)	Объем за 2 часа (м3)	Объем за 3 часа (м3)	Объем за 4 часа (м3)
0.1	5	0.46	38	200	0.3	0.6	0.9	1.2
0.2	5	0.92	19	200	0.3	0.6	0.9	1.2
0.2	10	0.65	39	100	0.6	1.2	1.8	2.4
0.2	15	0.53	57	66.7	0.9	1.8	2.7	3.6
0.3	15	0.80	38	66.7	0.9	1.8	2.7	3.6
0.4	29	0.76	55	34.5	1.74	3.48	5.22	6.96
0.6	50	0.87	63	20	3	6	9	12
0.8	75	0.95	71	13.3	4.5	9.0	13.5	18

Примечания:

1. Настройка, показанная в строке оливкового цвета, использовалась в начальных тестах на проверку.
2. Желтый прямоугольник не рекомендуется как настройка, информация представлена только для иллюстрации.

Сэмплер Gold Standard в Public Health England, Porton Down, испытан в ISO 14698 тестовом доме и показал эффективность на 25% выше. Также используется регулярно в критических зонах клиента класса A.

Новый сэмплер состоит из ISO-90 Sampling Head, который работает в сочетании с управляющим устройством ISO-CON, включающим вакуумный источник, сенсорный экран и HEPA-фильтрованный exhaust (необходим только в случае размещения ISO-CON в зоне класса A).

ISO-CON контролирует расход, время и другие функции пользователя (такие как данные оператора, местоположение и данные выполнения) через сенсорный экран и хранит память данных о выполнении. Диапазон расхода от 5 Л/мин до 100 Л/мин. Меньшие значения расхода (5 Л/мин или 10 Л/мин) поддержат d₅₀ около 0,5 мкм, минимизируя высыхание питательной среды, что позволяет дольше снимать образцы с одной тарелки (до 4 часов). Более высокий расход 100 Л/мин позволит взять 1 м³ за 10 минут, если нужно быстрее получить образец, но тарелку нужно будет сменить после 1 м³, так как среда высыхает быстрее.

Рисунки 1 и 2 показывают изображения нового сэмплера, включающего ISO-90 Sampling Head и управляющее устройство ISO-CON.

Процедура тестирования заключалась в одновременном тестировании эталонного сэмплера и трех сэмплеров, находящихся на проверке, в течение 20 минут на каждом из четырех мест сэмплирования, расположенных на нескольких метрах друг от друга.

Как видно из таблицы 2, среднее количество на каждом месте сэмплирования, которое является средним от всех четырех сэмплеров, имело незначительное отклонение в 5% между максимальными и минимальными показателями, что указывает на то, что условия тестирования оставались стабильными на протяжении всего периода испытания. Тарелки подсчитывались по количеству колоний на м³ воздуха после 5-дневной инкубации при 30-35°C. Результаты нормализованы для сравнения количества колоний на кубический метр снятого воздуха. Контрольная тарелка, 9-сантиметровая тарелка для осаждения, также была выставлена на каждом месте сэмплирования в течение 20 минут параллельно с воздушным сэмплированием.

Таблица 2: Средние показатели на месте сэмплирования и нормализованные данные по количеству колоний на м³ в зависимости от типа сэмплера

Воздушный сэмплер	Местоположение сэмплера и количество пластин (КОО)				Среднее количество пластин (КОО)	Нормализованное среднее количество пластин (КОО) на м3
	1	2	3	4
Референсный сэмплер	44	83	71	37	59	105
Новый сэмплер	41	34	39	41	39	130
Сито сэмплер A	70	71	66	103	78	78
Сито сэмплер B	71	47	63	47	57	57
Контроль	5	3	3	0	3	-
Среднее количество пластин (КОО) на место	57	59	60	57	-	-

Таблица 3: Сравнение относительных показателей восстановления и эффективности сбора для четырех сэмплеров

Воздушный сэмплер	Описание	Воздушный поток (л/мин)	Скорость воздуха на щели/сито (м/с)	Время для одного образца 1 м3 (мин)	d50 значение (мкм)	Биологическая эффективность (% от сэмплера ISO 14698 Test Lab)	Относительный показатель восстановления	Рассчитанная эффективность сбора
Референсный сэмплер	Щель к агару Единственная щель 0.152 x 44мм Пластина 14см TSA	28.3	72	35.3	0.42	125	1.00	1.25
Новый сэмплер	Щель к агару Единственная щель 0.2 x 22мм Пластина 9см	15	56.8	66.7	0.53	Будет определено независимым испытательным домом	1.30	1.63
Сито сэмплер A	Сито сэмплер 179 отверстий Радиус 0.375мм Пластина 9см	50	10.5	20.0	1.6	Будет определено независимым испытательным домом	0.74	0.93
Сито сэмплер B	Сито сэмплер 300 отверстий Радиус 0.300мм Пластина 9см	50	19.65	20.0	1.11	Будет определено независимым испытательным домом	0.54	0.68

Биологическая эффективность, коэффициент относительного восстановления и эффективность сбора трех протестированных пробоотборников были сравнены с эталонным пробоотборником. Если количество, собранное на м³ воздуха эталонным пробоотборником, принять за абсолютный коэффициент 1, то коэффициенты относительного восстановления, связанные с тремя тестируемыми пробоотборниками, показаны в Таблице 3. Новый пробоотборник с щелью для агара имел коэффициент относительного восстановления, который в 1,3 раза выше, чем у эталонного пробоотборника, и в 1,8 и 2,4 раза лучше, чем у ситовых пробоотборников A и B соответственно.

Биологическая эффективность сбора для эталонного пробоотборника была определена независимым испытательным центром (PHE, Porton Down), сравнив его с их эталонным пробоотборником Casella Slit с использованием метода, описанного в ISO 14698-1, и составила 125%. Используя коэффициенты относительного восстановления, были получены разумные оценки эффективности сбора для остальных трех единиц при работе в природной среде. Эти значения приведены в Таблице 3.

Дополнительные соображения

Способность пробоотборника восстанавливать воздушное загрязнение может быть определена с помощью его Рейтинга производительности (PR). PR пробоотборника — это концентрация воздушного загрязнения, которое пробоотборник способен восстановить при заданной концентрации загрязнения в воздухе, и он может быть вычислен по следующей формуле: Рейтинг производительности = n / (t * r * ) где: n = минимальное количество микробов, необходимое для того, чтобы пробоотборник мог измерить микробы при рассматриваемой концентрации в воздухе, t = время пробоотбора (мин.), r = скорость забора воздуха (м³/мин), = эффективность сбора пробоотборника (в доле).

Таблица 4: Рейтинги производительности пробоотборников

Пробоотборник	Рейтинг производительности (cfu/m3)
Эталонный пробоотборник	0.80
Новый пробоотборник	0.61
Ситовой пробоотборник A	1.08
Ситовой пробоотборник B	1.47

Для зоны EU Grade A лимит по воздушному микробному загрязнению составляет 1 cfu на м³. Используя значение 1 для n и рассчитанные коэффициенты сбора, можно вычислить PR для каждого пробоотборника, как показано в Таблице 4. Видно, что эталонный пробоотборник и новый пробоотборник способны восстанавливать концентрации загрязнений в воздухе ниже 1 cfu/m³, в то время как два часто используемых ситовых пробоотборника не могут.

Заключение теста

Сравнение количества воздушных микробов, одновременно собранных четырьмя пробоотборниками в одной и той же среде, показало, что новый пробоотборник имеет коэффициент восстановления, который в 1,8 и 2,4 раза выше, чем у ситовых пробоотборников A и B соответственно, и также в 1,3 раза выше, чем у эталонного пробоотборника. Когда рассчитываются коэффициенты сбора на основе этой информации, данные могут быть использованы для определения Рейтинга производительности для каждого пробоотборника для использования в среде с лимитом действия 1 cfu на м³ для воздушного загрязнения. Рейтинги производительности для эталонного пробоотборника и нового пробоотборника подтверждают, что оба смогут обнаружить загрязнение ниже этого лимита. Однако Рейтинги производительности для ситовых пробоотборников A и B показывают, что эти устройства не смогут обнаружить загрязнение ниже этого лимита. Следовательно, можно сделать вывод, что эталонный пробоотборник и новый пробоотборник подходят для мониторинга в зонах EU Grade A, в то время как ситовые пробоотборники A и B — нет.

Общее заключение

Новый пробоотборник ImpactAir ISO-90 — это инновационный активный пробоотборник, который может проводить пробоотбор в местах с критическим риском в зонах EU Grade A, превышая все рекомендации, изложенные в ISO 14698-1, будущий EN 17141 и последнюю редакцию 12 EC GMP Annex 1. Новый дизайн пробоотборника имеет высокую биологическую эффективность и значение d₅₀ в районе 0,5 мкм (в зависимости от выбранных размеров щели), что позволяет точно проводить пробоотбор до размера частиц 1 мкм в области, где необходимо доказать отсутствие роста.

Кроме того, новый пробоотборник может работать до 4 часов на одной пластине TSA 9 см, уменьшая вмешательство человека и возможность введения микробного загрязнения в критические зоны.

Мониторинг микробиологии на протяжении всей производственной серии с минимальным вмешательством человека для замены пластин теперь возможен и стоит рассмотреть для повышения качества продукции и безопасности пациентов.

Последняя мысль: пластина для оседания, неэффективный пассивный пробоотборник воздуха, используемый до четырех часов, может быть заменен на активный пробоотборник в течение того же периода времени.

Источники

1. ISO 14698-1: 2018 Cleanrooms and associated controlled environments— Biocontamination control, Part 1: General principles and methods. Geneva, Switzerland, International Organization for Standardization, 2003
2. Ljungqvist B и Reinmüller B. Monitoring efficiency of microbiological impaction air samplers. European Journal of Parenteral Sciences 2008; 13: 93-97. (значение d₅₀)
3. EN 17141:2020 Cleanrooms and associated controlled environments – Biocontamination control (на стадии окончательного утверждения перед публикацией)
4. EU GMP Annex 1: Manufacture of Sterile Medicinal Products, Revision 12 для консультации, 6 марта 2020 года
5. Eaton T. Effective Risk Management of Microbial Contamination. London, UK. SMi; Pharmaceutical Microbiology Conference. 2020.